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A0500-3010胎牛血清培養(yǎng)操作
細(xì)胞培養(yǎng)中,血清扮演著非常關(guān)鍵的角色,稍有不慎,可能會對您的實驗結(jié)果產(chǎn)生影響,接不來,我們將為大家梳理血清使用中的常見錯誤與規(guī)范操作。
一、血清解凍太心急
您在實驗室是否聽過這樣的觀點呢?將-20°℃冰箱冷凍的血清直接放入37C水浴鍋快速解凍,省時又省力。
正確操作:
長期-20°C冰箱儲存:血清正確儲存的溫度是-20°℃,不建議儲存4’C或-80°C
冰箱。
后果儲存4°C會導(dǎo)致血清成分降解或沉淀形成;-80°C解凍時由于溫差大,會導(dǎo)致血清沉淀大量析出
推薦解凍步驟:1)從-20°C冰箱取出血清2)置于4°C冰箱解凍3)融化期間均勻搖晃血清4)靜置于室溫環(huán)境
錯誤二:隨意更換血清品牌、批次
您心中是否產(chǎn)生過這樣的想法!
1)血清品牌都差不多,換品牌影響不大
2)實驗室一直用這個品牌血清?換批次前不需要測試,直接用,省得麻煩。
正確操作:一定要提前測試
由于血清來源于動物,其組分和含量會有差異,這也導(dǎo)致不同品牌/批次的血清質(zhì)量也會存在差異,一定要先小規(guī)模試用,觀察細(xì)胞增殖、形態(tài)等變化。選定合適血清批次后,盡量多囤積同批次血清,確保實驗穩(wěn)定性。
錯誤三:血清必須熱滅活實驗室的小白選手,耳邊是否有過這樣的提示
實驗室傳統(tǒng):血清必須熱滅活!
正確認(rèn)識熱滅活血清:
1.熱滅活≠必需:56°C水浴加熱30分鐘可破壞補體蛋白,但也會降解生長因子、維生素等,熱滅活血清主要用于補體敏感或免疫相關(guān)的實驗,可根據(jù)實驗需求決定血清是否熱滅活。
2.沉淀是正?,F(xiàn)象:56°C水浴加熱30分鐘會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,形成絮狀或顆粒狀沉淀,屬于正?,F(xiàn)象。
3.正確熱滅活步驟:
1)從-20°C冰箱取出血清2)置于4℃C冰箱解凍3)溶解4)56°C水浴30分鐘
注意:熱滅活血清均勻受熱,否則會影響血清質(zhì)量。
血清用對了,細(xì)胞培養(yǎng)事半功倍!血清使用不當(dāng),實驗數(shù)據(jù)、細(xì)胞狀態(tài)全“翻車"!快自查,別讓這些錯誤拖了你的實驗后腿~
GIBCO 10270-106胎牛血清
GIBCO A5256701胎牛血清
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Gemini 100-500胎牛血清
NTC SFBE胎牛血清
Sciencell 0510胎牛血清
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SIGMA F2442胎牛血清
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SIGMA F8318胎牛血清
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Bovogen SFBS南美胎牛血清
Bovogen SFBS新西蘭胎牛血清
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Hyclone SH30071.03胎牛血清
Hyclone SH30070.03胎牛血清
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